Амилаза слюны

Слюна – это сложная биологическая жидкость, участвующая в подержании гоместоза полости рта. В полости рта находится не чистый секрет слюнных желез, а так называемая смешенная слюна или ротовая жидкость. Она представляет с собой суммарный секрет всех слюнных желез, включает также микрофлору, содержимое десневых карманов, десневую жидкость, лейкоциты, остатки пищевых продуктов. Можно количественно определить активность фермента амилазы по Вольгемуту.

Метод основан на определении наименьшего количества амилазы, полностью расщепляющей добавленный крахмал. Амилазная активность слюны выражает объемом (в мл) 0,1%-ного раствора крахмала, который расщепляет 1мл не разведенной слюны при температуре 380С в течении 30 минут. В норме амилазная активность слюны составляет 160-320 единиц.

Данный метод не требует специальной аппаратуры, поэтому можно использовать в химическом кабинете сельской школы. Работать надо в перчетках.

Слюна является физиологической жидкостью. Слюна содержит белки: амилазу, лизоцим, альбумины, глобумины и муцин. Кислотность или основность среды физиологических жидкостей определяет биологическую активность клеток организма, которая, в свою очередь, определяется «работой» действующих в них ферментов. Каждая из физиологических жидкостей имеет определенное значение рН, и отклонение от нормы может быть причиной тяжелых заболеваний: рН слюны 6,8, возможные отклонения 5,6-7,9.

Значение ферментов невозможно переоценить. Только в человеческом организме ежесекундно происходит тысячи и тысячи ферментативных химических реакций. Ферменты амилазы, в которой содержится в слюне (его еще называют птиалином) и в соке тонкого кишечника, помогает превращению крахмала в мальтозу.

Амилаза относится к гидролизам, катализирует реакцию гидролиза.

Сейчас химикам известно более 2000 ферментов. Все они обладают рядом специфических свойств, отличающих их от неорганических катализаторов. Слюнные железа – крупные парные железа (три пары). В норме за сутки у человека выделяется 1,5-2 литра слюны.

Химический состав. (белки).

Лезоцим – обеззараживающее Муцин, участвующий Птиамини мальтоза- вещество слюны. в образовании пищевого ферменты, комка. расщепляющие крахмал до глюкозы.

В моей работе количественно определяла активность фермента амилазы по Вольгемуту. В 6 пробирок наливаю по 1мл воды, в первую их них добавляю 1мл разведенной в 10 раз слюны. Перемешиваю содержимое этой пробирки и переношу 1мл смеси во вторую пробирку. Содержимое второй пробирки также перемешиваю, переношу и продолжаю так делать до шестой пробирки. Из шестой пробирки выливаю 1мл смеси.

Во все пробирки добавляю по 1мл воды и по 2мл 0,1%-ного раствора крахмала, перемешиваю содержимое и встряхиваю пробирки и помещаю их в водяную баню при температуре 380С на 30 минут. После пробирки охлаждаю холодной водой, а затем добавляю в них по 1 капле 0,1%-ного раствора иода и перемешиваю. Амилаза слюны катализирует реакцию:

(С6Н10О5)n + nH2O= декстрины = С12Н22О11.

При реакции с йодом жидкость в пробирках окрашивается в желтый (мальтоза), оранжевый (ахродекстрины), красный (эритодекстрины), фиолетовый (аминодекстрины) и синий (крахмал) цвета.

Последней пятой пробирке окраска желтая, это говорит о том, что гидролиз крахмала прошел полностью. В шестой пробирке сахароза (появляется красно-бурый оттенок). В пятой пробирке содержится 1/160 не разведенной слюны.

Составляю пропорцию:

1/160мл. слюны расщепляет 2мл 0,1%-ного раствора крахмала.

1мл слюны расщепляет Х мл 0,1%-ного раствора крахмала.

Х = 2/1/1/160=320.

Следовательно, 1мл не разведенной слюны расщепляет за 30мин при температуре 380С 340мл 0,1-ного раствора крахмала.

Активность амилазы записывается следующим образом:

А(380С 30мин. ) = 320 единиц.

№ пробирки. 1. 2. 3. 4. 5. 6.

Разведение слюны. 1:10 1:20 1:40 1:80 1:160 1:220

Окраска раствора йода

синий фиолетовый красный оранжевый желтый красно- бурый.

Заключение.

Отсюда делаю вывод: амилазная активность моей слюны составляет 320единиц. Считаю, что амилазная активность моей слюны в норме. У меня зубы не болею, постоянно пользуюсь зубной пастой.

Хочу в дальнейшем исследовать зависимость активности амилазы слюны от вида применения зубной пасты и от вида жевательной резинки.